透析進樣毛細管電泳研究.pdf

1、毛細管電泳在分析復雜體系(如環(huán)境體系、生物體系)中小分子時，顆粒物和生物大分子常會帶來各種各樣的麻煩，必須對樣品進行煩瑣的預處理。但目前的預處理技術多是離線方式，不僅過程復雜，還會引起嚴重的樣品損失，給毛細管電泳在生命體系分析中的應用帶來不便。因此，發(fā)展可在線(或在柱)濾除大分子和顆粒物干擾、簡便易行的毛細管電泳方法，對進一步擴展毛細管電泳的應用有重要意義。本論文在分離毛細管進樣端口原位制備透析膜，建立了一種在柱透析進樣毛細管電泳方法。

2、該方法可對復雜樣品直接進樣，有效避免基質中大分子和顆粒物干擾；采樣量小，具有微透析特點。本研究詳細考察了該方法的性能，并進行了其應用研究。主要研究內容如下： 1)建立了透析進樣毛細管電泳方法并考察了系統(tǒng)性能。在分離毛細管進樣端端口采用相轉化法原位制備了聚砜膜。直接用該毛細管對復雜樣品中小分子采樣，實現(xiàn)了透析與毛細管電泳在柱聯(lián)用分析。膜在毛細管端口原位生成，與毛細管結合緊密，死體積小，能有效攔截大分子和顆粒物，pH耐受范圍寬，穩(wěn)定

3、性好，能連續(xù)使用12 h以上。電泳重現(xiàn)性好，柱效損失小。既可以電遷移進樣，也可以采用平衡透析進樣。 2)對系統(tǒng)性能進行了優(yōu)化。膜的截割分子量(樣品凈化能力)可以通過控制成膜液配方控制，提高了本方法的靈活性；進行了透析進樣毛細管電泳電化學檢測研究，提高了檢測靈敏度，擴大了本方法的使用范圍。 3)將本方法應用于咖啡牛奶中游離咖啡因的直接分析?？Х扰Ｄ虥]有經過任何預處理直接進樣，測定步驟簡單，蛋白等物質干擾小。測得其中游離咖啡

4、因濃度為0.68 mmol·L-1。 4)采用本方法研究了藥物與蛋白的相互作用。通過測定與大分子作用后的小分子的游離濃度，可以求解它們之間的結合常數(shù)。測得鹽酸異丙嗪與牛血清白蛋白的結合常數(shù)為：1.47×104 L·mol-1。與常規(guī)毛細管電泳相互作用分析方法相比，本方法中不存在大分子的干擾，在小分子與大分子相互作用分析中有廣泛的應用前景。 5)將本方法應用于內源性小分子的測定，測定了血糖濃度。采用柱端安培檢測，以自制銅微