脂肪細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激與炎癥及胰島素抵抗的關(guān)系研究.pdf

1、研究目的1、探討脂肪細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激(ERs)在肥胖、炎癥和胰島素抵抗中所起的作用及其分子機(jī)制。2、探討乙二醛酶1(GLO1)基因的A419C和C-7T多態(tài)性與上海地區(qū)2型糖尿病(T2DM)患者血管并發(fā)癥之間的關(guān)聯(lián)。
　　 材料與方法1、用實(shí)時(shí)定量PCR和Westerm印跡法分別檢測(cè)10例肥胖患者和14例正常體重對(duì)照者內(nèi)臟脂肪組織中ERs相關(guān)基因mRNA和蛋白表達(dá)水平,并分析其與炎癥因子水平及胰島素抵抗指數(shù)之間的相關(guān)性。2、以棕櫚

2、酸誘導(dǎo)的炎癥和胰島素抵抗的3T3-L1脂肪細(xì)胞為模型,觀察ERs抑制劑牛磺熊去氧膽酸(TUDCA)對(duì)脂肪細(xì)胞ERs相關(guān)蛋白重鏈結(jié)合蛋白(Bip)和真核翻譯起始因子2α(eIF2α),炎癥通路相關(guān)蛋白JNK、IKKβ和炎癥因子TYF-α、IL-6以及胰島素信號(hào)通路相關(guān)蛋白Akt等表達(dá)或磷酸化水平的影響。3、檢測(cè)上海地區(qū)395例T2DM患者GLO1基因的A419C和C-7T多態(tài)性分布頻率和等位基因頻率,并分析其與頸動(dòng)脈內(nèi)中膜厚度(CIMT)

3、和尿白蛋白/肌酐比值(ACR)水平、糖尿病腎病(DN)和糖尿病視網(wǎng)膜病變(DR)發(fā)生率等指標(biāo)的關(guān)系。
　　 結(jié)果：1、肥胖患者網(wǎng)膜脂肪組織中內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激(ERs)相關(guān)基因Bip、肌醇需求激酶1(IRE1)、類PKR的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)激酶(PERK)及氧調(diào)節(jié)蛋白150(ORP150)的表達(dá)量明顯高于正常體重者,PERK和ORP150的表達(dá)量與體重指數(shù)相關(guān),Bip、ORP150、X盒結(jié)合蛋白1(XBP1)及IRE1表達(dá)量與脂肪組織中TNF-α、

4、IL-6表達(dá)量相關(guān),ERs相關(guān)基因與血清TNF-α和HOMA-IR胰島素抵抗指數(shù)水平未發(fā)現(xiàn)相關(guān)性。2、棕櫚酸可誘導(dǎo)3T3-L1脂肪細(xì)胞發(fā)生ERs,并可通過激活JNK和IKKβ炎癥通路增加炎癥因子TNF-α和IL-6的表達(dá),同時(shí)抑制胰島素信號(hào)通路重要分子Akt的磷酸化水平,而內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激抑制劑TUDCA能抑制這些作用。3、在T2DM患者中,GLO1基因C-7T。多態(tài)性CC基因型的CIMI、和ACR水平顯著高于CT和TT基因型,GLO1-7C