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文檔簡介
1、前列腺癌的發(fā)病機制是一個復(fù)雜的過程,目前研究表明抗病毒酶RNase LR462Q基因型的突變與歐美人群前列腺癌的發(fā)生具有相關(guān)性。2006年,美國Urishman等在R462Q突變型的歐裔美國人前列腺癌組織內(nèi)鑒定到一種新的γ逆轉(zhuǎn)錄病毒--Xenotropic murine leukemia virus-related virus(XMRV)。它是目前為止發(fā)現(xiàn)的第一個能夠感染人類的γ逆轉(zhuǎn)錄病毒。但是不同實驗室和地區(qū)對于XMRV與前列腺癌相關(guān)
2、性的研究所得結(jié)論迥異,同時也有研究發(fā)現(xiàn)XMRV檢測過程中存在鼠源污染的問題??紤]到XMRV病毒潛在的醫(yī)學和社會影響,本研究考察了中國前列腺癌人群和健康人群中XMRV的感染情況,同時考察了R462Q基因型與中國前列腺癌的相關(guān)性。
實驗方法:
1.采用PCR和傳統(tǒng)Sanger測序的方法,我們對240例漢民族獻血者和125例前列腺癌樣本的RNase L R462Q位點的基因分型進行鑒定。
2.利用巢式
3、PCR對170例前列腺癌患者和392例獻血者進行XMRV序列的檢測分析及全基因組擴增;qPCR檢測病毒拷貝數(shù);Western Blot和血漿-LNCap共培養(yǎng)檢測病毒蛋白及感染能力。
3.同時用mtDNA PCR方法篩查鼠基因組污染。
結(jié)果:
1.R462Q位點Q的基因頻率在漢民族健康獻血者中為20.2%,在前列腺癌患者中為17.2%。
2.通過巢式PCR在5例前列腺癌和5例獻血者
4、樣本中檢測到鼠內(nèi)生性逆轉(zhuǎn)錄病毒(mouse endogenous retrovirus,mERVs)片段,這些片段的堿基序列與已知XMRV相應(yīng)序列有不同程度的差異,但沒有檢測到病毒全基因組;qPCR分析顯示陽性樣本中mERV拷貝數(shù)目極低;同時Western Blot和血漿-LNCap共培養(yǎng)均沒有檢測到XMRV蛋白信號。
3.采用mtDNAPCR的方法在2例獻血者樣本中檢測到鼠基因組污染。
結(jié)論:本研究結(jié)果表明
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