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1、目的:1.探討巨噬細(xì)胞衍生趨化因子(MDC)、單核細(xì)胞趨化蛋白4(MCP-4)在RSV毛支中的作用;2.觀察糖皮質(zhì)激素在RSV毛支中的療效及對(duì)MDC、MCP-4的調(diào)控;3.研究P38MAPK在RSV毛支中的作用及與MDC、MCF-4的相關(guān)性. 方法:1.RSV毛支臨床檢測(cè):收集2005年11月~2006年3月期間60例RsV檢測(cè)陽(yáng)性的毛細(xì)支氣管炎患兒及30例健康兒的外周血標(biāo)本, RSV毛支患兒于入院后第1天、5天分別抽取NPS標(biāo)
2、本.RSV毛支患兒按臨床癥狀分為輕、中、重度,隨機(jī)分成激素組(布地奈德組)和非激素組.ELISA法檢測(cè)血清和NPS中MDC、MCP-4、IL-4和磷酸化P38MAPK水平,外周血和NPS中EOS計(jì)數(shù).2.單個(gè)核細(xì)胞培養(yǎng):分離健康志愿者外周血單個(gè)核細(xì)胞,光鏡觀察細(xì)胞形態(tài)學(xué)特征,調(diào)整細(xì)胞濃度,加PHA誘導(dǎo)細(xì)胞因子分泌,設(shè)對(duì)照組(A組)、地塞米松組(B組)、P38MAPK抑制劑組(C組),每組設(shè)2孔,5﹪C02下培養(yǎng)36小時(shí),觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況
3、,ELISA法檢測(cè)細(xì)胞上清液MDC、MCP-4和IL-4水平,RT-PCR法檢測(cè)細(xì)胞MDC、MCP-4 mRNA表達(dá). 結(jié)果:1.RSV毛支臨床檢測(cè)(1)外周血各指標(biāo)ELIsA檢測(cè)結(jié)果顯示:毛支患兒血清MDC[(692.67±107.22)pg/ml]和MCP-4[(103.56±27.31)pg/m1]均顯著高于健康對(duì)照組[分別為(242.12±27.40)pg/ml,(86.3±14.50)pg/ml],有非常顯著性差異(P
4、均<0.01);毛支患兒血清IL-4[(19.74±7.40)pg/m1]顯著高于健康對(duì)照組[(9.22±4.09)pg/ml](P<0.01) 2.單個(gè)核細(xì)胞培養(yǎng)(1)PBMC細(xì)胞形態(tài)觀察:培養(yǎng)36h可見添加PHA的PBMC細(xì)胞呈淋巴細(xì)胞母聚集化,成簇生長(zhǎng),為懸浮細(xì)胞;而未添加PHA的PBMC細(xì)胞呈平鋪式生長(zhǎng),為懸浮細(xì)胞. 結(jié)論:1.趨化因子MDC、MCP-4與RSV毛支氣道炎癥關(guān)系密切;MDC、MCP-4水平可反映毛
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