紅花酢漿草葉斑病病原生物學(xué)特性研究.pdf

1、紅花酢漿草(OxaliscorymbosaDC.prodr.)又名大酸葉草、銅錘草、紫花酢漿草、多花酢漿草，系酢漿草科多年生宿根性闊葉草本。該草原產(chǎn)于南美熱帶地區(qū)，我國則主要分布在河北、陜西、華東、華中、華南、四川和云南等地，曾作為觀賞植物引入長江以北地區(qū)，后在南方地區(qū)逸散為野生雜草。紅花酢漿草具有極強(qiáng)的繁殖力、生長能力和侵占性。在貴州省貴陽及獨(dú)山地區(qū)常為害辣椒、玉米、花生、大豆、西瓜等作物，造成嚴(yán)重減產(chǎn)，成為當(dāng)?shù)睾档刈魑锏膼盒噪s草之一

2、；在南方地區(qū)成為城市草坪雜草，或園林地惡性雜草，是重慶地區(qū)危害性極大的外來入侵植物。 目前對紅花酢漿草的防治主要依靠化學(xué)方法，化學(xué)除草劑盡管在解決全球的糧食危機(jī)中發(fā)揮了巨大的作用，但已對生態(tài)環(huán)境造成了嚴(yán)重的殘毒污染，使得環(huán)境質(zhì)量惡化，并威脅到人類自身的健康；另一方面，耐藥性雜草種群上升和抗化學(xué)除草劑雜草的出現(xiàn)，已成為不可忽視的問題。利用生防菌控制紅花酢漿草的研究尚剛剛起步，但由于生物防治具有安全性高、持效期長、投入少等優(yōu)點(diǎn)，因此

3、該領(lǐng)域是極具潛力的研究熱點(diǎn)之一。通過調(diào)查發(fā)現(xiàn)，重慶市各城區(qū)紅花酢漿草均有不同程度的葉斑病發(fā)生，部分城區(qū)極為嚴(yán)重，可造成紅花酢漿草大面積枯死。而目前對引起紅花酢漿草葉斑病病原真菌的研究主要集中在病原調(diào)查方面，關(guān)于該病原菌的其他特性的研究鮮有報(bào)道。 試驗(yàn)對重慶市西南大學(xué)校園內(nèi)的紅花酢漿草葉斑病病原菌進(jìn)行了分離培養(yǎng)和鑒定，并進(jìn)一步就其生物學(xué)特性，以及液體培養(yǎng)時(shí)間對菌絲生長量的影響進(jìn)行了初步研究，最后進(jìn)行了病原菌對主要農(nóng)作物的安全性測試

4、。具體的研究結(jié)果如下：觀察和測量結(jié)果顯示：該病原菌僅為害紅花酢漿草葉片，斑點(diǎn)生于葉的兩面，近圓形，直徑2.0～9.0mm，有時(shí)多斑愈合，葉正面斑點(diǎn)中央淺褐色至中度褐色，邊緣暗褐色，具淺黃褐色暈，葉背斑點(diǎn)灰白色至青黃褐色。子實(shí)體葉兩面生，但多生于葉正面。病原菌子座無或僅由少數(shù)無色球形細(xì)胞組成。分生孢子梗短，單生或簇生在球形細(xì)胞或內(nèi)生菌絲上，近無色，多基部較寬，不分枝，直立，上部具1個曲膝狀折點(diǎn)，頂部圓形至圓錐形，或近平截，無隔膜，3.0～

5、20.0μm×2.0～4.0μm。分生孢子窄，倒棍棒形至圓柱形，近無色，直立至彎曲，頂部尖細(xì)至鈍，基部倒圓錐形平截至近平截，2～9個隔膜，20.0～86.5μm×2.0～3.0μm。依據(jù)上述特征，判定引起紅花酢漿草葉斑病的病原菌，為假尾孢屬真菌紅花酢漿草假尾孢(PseudocercosporaoxalidisGoh&Hsieh)。通過分離培養(yǎng)及致病性測定獲得病原菌，將其命名為JH-016-01。 研究結(jié)果顯示，適合紅花酢漿草假尾

6、孢菌生長的培養(yǎng)基有紅花酢漿草葉片煎汁+葡萄糖20g，V8汁和Richard培養(yǎng)基。適合該菌菌落生長的pH范圍3～12，最適pH4～6，最適溫度20～25℃，致死溫度55℃。該病原菌對麥芽糖、葡萄糖、蔗糖、乳糖和牛肉膏的利用效果好于其它碳源或氮源。光照對該菌菌絲生長速度的影響不明顯，但不同處理可影響菌落形態(tài)。此外，光暗交替處理有利于該菌分生孢子的產(chǎn)生。其分生孢子萌發(fā)的適宜溫度為20～25℃，pH4～6，相對濕度為98﹪～100﹪，且營養(yǎng)對

7、孢子萌發(fā)有促進(jìn)作用。 紅花酢漿草葉斑病病原菌系半知菌亞門假尾孢屬真菌，關(guān)于此屬真菌分生孢子的誘導(dǎo)產(chǎn)生問題，目前的文獻(xiàn)資料均持分生孢子不易在人工培養(yǎng)基上產(chǎn)生的觀點(diǎn)。本試驗(yàn)研究結(jié)果與此觀點(diǎn)相吻合，即紅花酢漿草葉斑病病原菌在各種培養(yǎng)基上產(chǎn)生分生孢子的數(shù)量都較少。但在不同培養(yǎng)基上，其產(chǎn)孢能力仍表現(xiàn)出了差異性，具體表現(xiàn)為：在幾種供試的培養(yǎng)基中，以V8汁培養(yǎng)基上產(chǎn)生分生孢子最多，其次是紅花酢漿草葉片榨汁+葡萄糖培養(yǎng)基和玉米粉培養(yǎng)基，再次是P

8、DA培養(yǎng)基，以PSA培養(yǎng)基上產(chǎn)生的分生孢子數(shù)量最少。觀察發(fā)現(xiàn)，在各種人工培養(yǎng)基上產(chǎn)生的分生孢子其隔膜均沒有自然條件下的分生孢子隔膜明顯，顏色相對較淺，且頂端鈍圓。初次分離的病原菌在各種培養(yǎng)基上產(chǎn)孢均比較理想，繼代后，該病原菌的產(chǎn)孢能力顯著下降，繼代多次后，在培養(yǎng)基上幾乎檢查不到分生孢子。 進(jìn)一步的研究發(fā)現(xiàn)，液體培養(yǎng)條件下該病原菌因培養(yǎng)時(shí)間不同，其菌絲的生長量存在明顯差異。培養(yǎng)3～7天，菌絲體干重隨培養(yǎng)時(shí)間的延長而增加，培養(yǎng)第7天

9、菌絲體干重達(dá)到最大值，培養(yǎng)第9天，菌絲體干重出現(xiàn)下降趨勢。離體接種試驗(yàn)表明，該病原菌發(fā)酵液對紅花酢漿草離體葉片有一定的致病作用，且不同培養(yǎng)時(shí)間的發(fā)酵濾液均能導(dǎo)致離體葉片發(fā)生病變。 試驗(yàn)還選擇禾本科玉米，豆科大豆、菜豆和花生，葫蘆科西瓜，茄科茄子、番茄、辣椒和煙草，及十字花科白菜、蘿卜、萵苣、甘藍(lán)和小白菜，共5科13屬的農(nóng)作物對該病原菌(JH-016-01)的敏感性進(jìn)行了測試。結(jié)果顯示，花生對JH-016-01輕度敏感，其他測試作