狗牙根彎孢霉葉斑病的病原學研究.pdf

1、葉斑病是發(fā)生在高爾夫球場草坪上的一種重要病害，主要引起多種草坪草的葉斑和葉枯，嚴重影響草坪景觀，破壞草坪質(zhì)量。目前對該病的研究仍僅限于病害的調(diào)查和初步的化學防治，國內(nèi)外還未見有較系統(tǒng)的研究報道。本研究旨在確定引起狗牙根葉斑病的病原，了解病菌的寄主范圍、生物學特性，以及進行殺菌劑的初步篩選和病菌對四種草坪草的侵入過程觀察。研究結(jié)果如下： 從鄂州紅蓮湖高爾夫球場的狗牙根發(fā)病植株葉片上分離菌株Curvularia sp.，用菌絲塊接種

2、狗牙根葉片進行致病性測定，證實Curvularia sp.為致病菌。該菌在PDA培養(yǎng)基上培養(yǎng)5d后，菌落呈墨綠色，菌絲褐色，有隔，分枝，分生孢子平均大小為11.07×25.18μm，褐色至暗褐色，橢圓形，具有3個隔膜，主隔膜明顯加粗，中間兩細胞較大。rDNA-ITS測序結(jié)果與GeneBank中的序列進行同源性比較發(fā)現(xiàn)菌株與Curvularia verruculosus的同源性高達99％。根據(jù)形態(tài)學特征和分子鑒定結(jié)果，確認該病原菌為Cur

3、vuloria verruculosus。寄主范圍測定結(jié)果表明，該菌可侵染供試的四種草坪草(狗牙根、黑麥草、高羊茅、早熟禾)、水稻、小麥和玉米等禾本科植物。 病原菌生物學特性研究結(jié)果表明，在有無光照或連續(xù)光照的條件下病菌均可生長和產(chǎn)孢，光暗交替最有利于菌絲的生長，黑暗條件下促進病菌產(chǎn)孢。該菌株在15-35℃的范圍內(nèi)均能生長和產(chǎn)孢，30℃為菌絲生長最快溫度，最適產(chǎn)孢溫度為25℃。病菌在pH值為4-12的PDA培養(yǎng)基上菌絲均能生長，

4、其中以pH7生長最快；病原菌在pH 5-12范圍內(nèi)均可產(chǎn)孢，產(chǎn)孢最適pH值為6。病菌能夠有效利用多種碳源和氮源，甚至在無碳或無氮條件下都能生長，但不同碳源和氮源對彎孢霉病菌菌絲生長和產(chǎn)孢有極顯著的影響。病原菌分別以淀粉為碳源以及以酵母膏為氮源時生長最好，半乳糖和硝酸鈣有利于該菌分生孢子的產(chǎn)生。試驗證明55℃的溫水處理10min可殺死菌絲體、抑制孢子萌發(fā)。PDA平板抑菌實驗結(jié)果表明，供試六種藥劑在設(shè)置的不同濃度下對病原菌的生長都有一定的抑

5、制作用，其中10％世高可分散粒劑和30％愛苗乳油對菌絲生長有很好的抑制效果，10％多抗霉素B粉劑抑制效果最差。 噴霧病原菌分生孢子懸浮液于狗牙根、黑麥草、高羊茅、早熟禾等幾種草坪草活體葉片上并保濕培養(yǎng)，在接種后不同時間點分別從每個寄主上取樣，對樣品進行組織透明、染色，觀察病原菌對寄主植物的侵染過程。結(jié)果表明，在四種寄主上接種后3h內(nèi)均可以觀察到分生孢子的萌發(fā)，分生孢子可以從一端或兩端萌發(fā)，產(chǎn)生單根或2-4根芽管。接種后3h時分生

6、孢子在不同寄主葉片上的萌發(fā)率沒有差異性，而6h后分生孢子在不同寄主上的萌發(fā)率有微小差異，12h時，病原菌分生孢子在狗牙根和早熟禾葉片上的萌發(fā)率分別為96％和92％，略高于其在黑麥草和高羊茅上的萌發(fā)率。彎孢霉分生孢子在四種不同的草坪草上都較易萌發(fā)，24h時萌發(fā)率均超過90％，48h時在狗牙根葉片上萌發(fā)率達100％。病原菌分生孢子在寄主表面萌發(fā)后，可以從葉片氣孔或表皮直接侵入，其中以氣孔侵入為主。接種后6h便可以觀察到有病菌從氣孔侵入，病原