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1、本文主要對(duì)河南蜂膠揮發(fā)油的提取、成分鑒定及理化性質(zhì)、清除DPPH自由基能力、抑蜜蜂球囊菌活性進(jìn)行了研究,結(jié)果如下:
(1)采用有機(jī)溶劑浸提法提取蜂膠揮發(fā)油,比較了石油醚、正己烷、乙醚、四氯化碳四種溶劑的提取率,確定石油醚為最佳溶劑。采用正交試驗(yàn)優(yōu)化微波-超聲波輔助技術(shù)提取蜂膠揮發(fā)油的工藝,其最佳工藝條件為:料液比1:20,浸提溫度40℃,微波爐選擇中檔功率,提取時(shí)間15 min。該條件下的提取率高達(dá)12.32%,說(shuō)明微波-
2、超聲波協(xié)同輔助這種新技術(shù)具有很強(qiáng)的可行性。
(2)采用GC-MS技術(shù)對(duì)石油醚、正己烷、乙醚、四氯化碳四種溶劑浸提物(分別為PEP、HEP、TEP、DEP)的成分進(jìn)行鑒定分析。其中PEP鑒定出60種化合物,HEP49種化合物,TEP46種化合物,DEP47種化合物,其相對(duì)百分含量分別為34.18%,30.03%,47.66%,35.14%。主要成分有烷烴、烯、醇、酸、醛、酮、酯類(lèi)等化合物,但各成分在含量上存在很大的差異,表明
3、溶劑的極性會(huì)影響其對(duì)蜂膠揮發(fā)性成分的選擇性。
(3)參考GB/T14454,GB/T14455等國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)對(duì)蜂膠揮發(fā)油PEP的9項(xiàng)理化指標(biāo)進(jìn)行了初步的檢測(cè),結(jié)果顯示:PEP為黃色透明油狀液體,有濃郁香味;在25℃時(shí),PEP的相對(duì)密度為0.936;折光率為1.43505;熔程為25℃~47℃;凝點(diǎn)為24℃;PEP在乙醇中的溶混度表示為1 mL的PEP能完全溶解于17.6 mL的90%乙醇溶液中;PEP的酸值與酯值分別為14.8
4、和16.7;羰基化合物含量和含酚量分別為11.8%,60.4%。
(4)以DPPH自由基清除能力評(píng)價(jià)了TEP、PEP、HEP及DEP的抗氧化活性。Duncan多重比較分析結(jié)果顯示:TEP、PEP、HEP及DEP之間的抗氧化活性差異極顯著(P<0.01),抗氧化活由強(qiáng)到弱的順序?yàn)門(mén)EP>PEP>HEP>DEP;TEP和蜂膠的抗氧化活性在5%水平上差異不顯著,但均表現(xiàn)出很強(qiáng)的清除DPPtH自由基能力。TEP、PEP、HEP及D
5、EP的抗氧化活性都呈現(xiàn)量效關(guān)系,即DPPH自由基清除率隨著濃度增大而升高;清除自由基的IC50分別約為5μg/mL,10μg/mL,50μg/mL,200μg/mL。TEP具有很強(qiáng)抗氧化活性與其含大量的高良姜素、松屬素等黃酮類(lèi)物質(zhì)有關(guān);而DEP的抗氧化活性很弱可能與DEP中含有具有抗氧化活性的酯類(lèi)和酚類(lèi)物質(zhì)非常少有關(guān)。
(5)采用生長(zhǎng)速率法和試管連續(xù)稀釋法分析蜂膠與蜂膠揮發(fā)油PEP抑蜜蜂球囊菌活性,并與制霉菌素的抑菌效果作
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