β地中海貧血HLA配型的胚胎植入前遺傳學(xué)診斷.pdf

1、中山大學(xué)博士學(xué)位論文β地中海貧血HLA配型的胚胎植入前遺傳學(xué)診斷姓名：鄧捷申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：博士專業(yè)：婦產(chǎn)科生殖醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師：莊廣倫20040425!生查堂墮!：蘭竺絲塞：型堡Q些塑墊墮堅(jiān)!壘墼型盟墅墮墮△塑壟墅蘭蘭羔!!!L帶者，他們的后代中有1／4的幾率為重型p地貧患兒，要靠輸血維持生命，通常在10歲以前死于高鐵血紅素沉積癥等。過(guò)去主要通過(guò)產(chǎn)前診斷和選擇性引產(chǎn)來(lái)防止重型D地貧患兒的出生，現(xiàn)在可以借助胚胎植入前遺傳學(xué)診斷技術(shù)，對(duì)體外受精并

2、發(fā)育到6—8細(xì)胞期的胚胎進(jìn)行p地貧基因的遺傳學(xué)診斷，選擇非重型p地貧的胚胎移植回子宮，從一開(kāi)始就避免妊娠一個(gè)重型p地貧胎兒及所造成的治療性引產(chǎn)。自1996年E1Hashemite(E1liashemiteetal1996)首次對(duì)p地貧進(jìn)行植入前遺傳學(xué)診斷以來(lái)，世界各地相續(xù)報(bào)道了p地貧的植入前遺傳學(xué)診斷，國(guó)內(nèi)也于2003年報(bào)道了對(duì)B地貧的植入前遺傳學(xué)診斷(焦?jié)尚竦?003)。本研究希望對(duì)那些已出生重型D地貧患兒且希望對(duì)患兒進(jìn)行造血干細(xì)胞移

3、植的患者夫婦，在進(jìn)行植入前診斷時(shí)，可以對(duì)他們的胚胎同時(shí)進(jìn)行D地貧及HLA配型的檢測(cè)，選擇HLA型與患兒相同的非重型p地貧胚胎移植回子宮，使出生的嬰兒不但是健康兒，且具有與同胞患兒相同的HLA型，其臍血或骨髓可以用于進(jìn)行造血干細(xì)胞移植治療。這樣，在防止出生重型B地貧患兒的同時(shí)，達(dá)到治療已出生的重型B地貧患兒的目的。本研究由兩部分組成，第一部分應(yīng)用熒光PCR(F—PCR)技術(shù)在單細(xì)胞水平檢測(cè)B地貧基因及與其緊密連鎖的多態(tài)性位點(diǎn)，并與傳統(tǒng)的巢

4、式PCR相比較，評(píng)估熒光PCR在6地貧植入蒔診斷中的可行性。第二部分針對(duì)中國(guó)人16種D地貧突變類型和8種常見(jiàn)的HLA—DRBl基因型，建立了穩(wěn)定的單細(xì)胞多重巢式PCR檢測(cè)技術(shù)，可同時(shí)檢測(cè)p珠蛋白基因，與p珠蛋白基因緊密連鎖的STR基因及HLA—DRBl基因，并對(duì)4例已出生重型D地貧患兒的患者進(jìn)行了p地貧HLA配型的PGD治療。第一部分應(yīng)用熒光PCR檢測(cè)單細(xì)胞D地中海貧血基因及與其緊密連鎖的多態(tài)性位點(diǎn)目的：應(yīng)用熒光PCR(F_PCR)技術(shù)